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如何正確選擇PCR耗材才能讓實驗更順利?
2022-06-17

作為科研者們,了解與PCR / qPCR耗材相關的特性和術語非常重要。今天我們就來給大家一篇滿滿干貨,可以選擇適合您的耗材以獲得準確可靠的實驗數(shù)據(jù)。

工欲善其事,必先利其器,不僅實驗本身,其實就連實驗的耗材都隱藏著大學問。



影響PCR實驗結(jié)果得原因有很多:通常有以下8種。

1、引物:引物是PCR 特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA 互補的程度;

2、 酶及其濃度 ;

3、dNTP的質(zhì)量與濃度;

4、模板(靶基因)核酸;

5、Mg2+濃度;

6、溫度與時間的設置;

7、循環(huán)次數(shù);

8、設備、耗材等。


在眾多影響因素中,耗材是一個非常重要、也極容易被忽視的因素之一。


賽普生物的PCR耗材類型眾多:八聯(lián)排管、單管、無裙邊、半裙邊,全裙邊等一系列的PCR耗材,選擇起來非常困難,在這中間存在許多具有共性的問題。


我們對這些問題進行了匯總,一起來看看大家在選用 PCR耗材時都遇到了哪些問題,又該如何解決呢?


             



常見問題及解決辦法


Q

賽普生物的PCR耗材是什么材質(zhì)的呢?

A

答:賽普生物的PCR耗材都是進口聚丙烯(PP)材質(zhì),嚴格按照高質(zhì)量標準生產(chǎn),實驗結(jié)果均一性好,管壁薄且均勻,保證了傳熱速度和樣品受熱均勻,十萬級無塵凈化車間生產(chǎn),確保產(chǎn)品無熱原、無內(nèi)毒素、無 DNA 酶、無 RNA 酶。密封性好 , 可預防交叉污染;孔間差異小,防止變形。


Q

賽普生物有不同體積的PCR 管/板,該怎么選呢?

A

答:賽普生物PCR管/板的體積基本都可以滿足PCR反應要求。


常見反應管規(guī)格及體積:

單管:0.5mL,0.2mL

96孔板:0.2mL, 0.1mL

八聯(lián)排管:0.2mL, 0.1mL


Q

不同顏色的PCR 管/板,我該怎么選呢?

A

答:對于普通的PCR反應選用透明的PCR管就可以。


但qPCR更推薦選用優(yōu)質(zhì)的白色PCR耗材。


由于qPCR需要實時定量檢測熒光信號強度,更需要靈敏、精確的熒光信號傳遞。與傳統(tǒng)的透明PCR產(chǎn)品相比,白色PCR產(chǎn)品可最大程度地反射熒光信號,減少孔間信號交叉污染,可優(yōu)化實時熒光定量PCR的結(jié)果。





Q

賽普生物的PCR板有什么區(qū)別呢?

A

答:一般分為無裙邊、半裙邊、全裙邊。


無裙邊

半裙邊

全裙邊


無裙邊板:可適用于大多數(shù)的PCR儀或qPCR儀,但不適用于自動化、應用。移液過程中穩(wěn)定性不高,需要配合板托使用。


半裙邊板:可適配標簽或應用條碼,及自動化應用,且有著較好的移液穩(wěn)定性。


全裙邊板:非常適用于自動化實驗應用,也可適配標簽及應用條碼。機械強度較好,可適用于凸出模塊的PCR儀,且移液過程中穩(wěn)定性高。


Q

96孔切角和標識?

A

答:A切角:PCR板的切角位置選擇取決于適配儀器要求,便于定位。



B標識:PCR板的數(shù)字字母標記有助于識別單個孔及樣品位置。


一般為 凸出的顏色數(shù)字標識或者印刻標識。對于一些自動化應用實驗,印刻標記的反應板密封性會更好。



蘇州賽普生物科技有限公司擁有專業(yè)的技術開發(fā)、技術服務團隊;具有專業(yè)的實驗室和一流的設備。PCR 實驗配套消耗品廣泛應用于遺傳、生化、免疫、醫(yī)藥等領域,包含基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究以及疾病的診斷或有 DNA、RNA 的地方,主要配合 PCR/qPCR/ 實時 PCR 等實驗。

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